Immunoelectrophoresis एक मरीज के रक्त में मोनोक्लोनल एंटीबॉडी के प्रयोगशाला निदान का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है। मोनोक्लोनल एंटीबॉडी एक ही सेल से प्राप्त होते हैं और एक ही एंटीजन के खिलाफ निर्देशित होते हैं। इस कारण से, उन्हें रोगविज्ञानी के रूप में मूल्यांकन किया जाना है और, यदि सिद्ध हो, तो वाल्डेनस्ट्रोम की बीमारी जैसे रोगों के लिए बोलें।
इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेसिस क्या है?
Immunoelectrophoresis का उपयोग रोगी के रक्त में मोनोक्लोनल एंटीबॉडी के प्रयोगशाला नैदानिक पता लगाने के लिए किया जाता है।आयनों में अलग-अलग गतिशीलता होती है। यह अलग-अलग गतिशीलता इलेक्ट्रोसेरसिस प्रक्रिया का आधार बनती है। ये विधियाँ अलग-अलग पदार्थों को एक दूसरे से अलग करती हैं विद्युत क्षेत्रों और गुरुत्वाकर्षण का उपयोग करते हुए। क्षेत्र में एक प्रसिद्ध विधि इम्यूनोइलेक्ट्रोफेरेसिस है।
यह एक गुणात्मक निदान पद्धति है जिसका उपयोग मोनोक्लोनल एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए किया जाता है। एंटीबॉडी एक विशिष्ट सेल लाइन से प्रतिरक्षात्मक रूप से सक्रिय प्रोटीन पदार्थ हैं। मोनोक्लोनल एंटीबॉडी सभी एक ही बी लिम्फोसाइटों पर आधारित होते हैं और इसलिए एक एकल एपिटोप के खिलाफ निर्देशित होते हैं। हमलावर एंटीजन के लिए हर प्राकृतिक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया एक पॉलीक्लोनल प्रतिक्रिया से मेल खाती है और इसलिए विभिन्न एपिटोप के खिलाफ निर्देशित होती है। एक मोनोक्लोनल प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया इसलिए पैथोलॉजिकल बॉडी प्रक्रियाओं के संकेत प्रदान करती है।
मोनोक्लोनल एंटीबॉडी विभिन्न अणुओं को उच्च विशिष्टता के साथ बांधते हैं। इस बंधन को इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेसिस के माध्यम से प्रदर्शित किया जा सकता है। प्रक्रिया प्रयोगशाला निदान में एक गुणात्मक प्रक्रिया है और इसमें दो प्रकार की प्रक्रिया, सीरम वैद्युतकणसंचलन और इम्यूनोडिफ्यूजन शामिल हैं।
कार्य, प्रभाव और लक्ष्य
इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेसिस इम्युनोडिफ्यूजन के साथ सीरम वैद्युतकणसंचलन की पद्धति को जोड़ती है। रोगी के सीरम को एक agarose जेल या सेलूलोज़ एसीटेट फिल्म पर रखा गया है। एक नियंत्रण सीरम भी लगाया जाता है। आवेदन नमूने के एक इलेक्ट्रोफोरेटिक जुदाई के बाद है। एंटीसेरा, आईजीजी, आईजीए, आईजीएम, सामान्य वैद्युतकणसंचलन के लिए एसिटिक एसिड और डिवाइडिंग लाइनों के बीच कप्पा और लैम्ब्डा लगाया जाता है।
यह रोगी के सीरम में एंटीबॉडी के साथ एक प्रतिक्रिया बनाता है, जो वर्षा की रेखाएं बनाता है। इस्तेमाल किए गए एंटिसेरम और व्यक्तिगत रेखाओं की स्थिति और आकार के आधार पर, निष्कर्षों को प्रकाश श्रृंखला कप्पा या लैम्ब्डा के साथ शामिल इम्युनोग्लोबुलिन के बारे में तैयार किया जा सकता है। एक लैम्ब्डा बैंड के मामले में, एंटीबॉडी से बने मुफ्त प्रकाश श्रृंखला हैं। प्रयोगशाला दुर्लभ IgE और IgD के माध्यम से अतिरिक्त साक्ष्य प्रदान करती है, जो इम्युनोग्लोबुलिन के सटीक निर्धारण की अनुमति देता है। इम्यूनोडिफ़्यूज़न इलेक्ट्रोफोरेसिस की एक विधि पियरे ग्रैबर और कर्टिस विलियम्स के अनुसार होती है और प्रोटीन और एंटीबॉडी प्रसार के agarose जेल वैद्युतकणसंचलन के संयोजन से मेल खाती है।
सबसे पहले agarose gel वैद्युतकणसंचलन होता है। इसके बाद, निहित एंटीबॉडी एंटीजन के बैंड के खिलाफ फैलते हैं और इस तरह अवक्षेपित मेहराब बनाते हैं। यह लॉरेल के अनुसार रॉकेट इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेसिस से अलग किया जाना है, जो एक agarose जेल के भीतर प्रोटीन के वैद्युतकणसंचलन से मेल खाती है, जिनमें से प्रत्येक में एक निश्चित एकाग्रता में एंटीबॉडी हैं। जेल में थोड़ा बुनियादी बफर होता है, जो केवल एंटीजन को माइग्रेट करने की अनुमति देता है और जो आइसोइलेक्ट्रिक बिंदु के लिए अधिकांश एंटीबॉडी को थोड़े मूल पीएच मान के संपर्क में आने तक मजबूर करता है जब तक कि वे इलेक्ट्रोफोरेटिक रूप से चलना बंद नहीं करते।
एक रॉकेट इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेसिस की शुरुआत में एंटीजन की अधिकता होती है, जिससे घुलनशील एंटीजन-एंटीबॉडी परिसरों का निर्माण होता है। इलेक्ट्रोफोरेसिस के दौरान, एंटीजन और अन्य एंटीबॉडी के बीच भी बंधन होता है। इस तरह, इम्युनोप्रेसीपिट्स समतुल्य बिंदु पर बनते हैं, जो एंटीजन एकाग्रता के लिए आनुपातिक ऊंचाई के साथ रॉकेट जैसी आकृति के होते हैं। परीक्षण का मूल्यांकन करने के लिए अवक्षेप की ऊंचाई को मापा जाता है।
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एकाधिक मायलोमा और वाल्डेनस्ट्रॉम की बीमारी के निदान के लिए मोनोक्लोनल एंटीबॉडी का पता लगाने का विशेष महत्व है। प्रदान किए गए सबूत प्रतिरक्षा कोशिकाओं के घातक अध: पतन के लिए बोलते हैं। मल्टीपल मायलोमा अस्थि मज्जा में एक कैंसर से मेल खाती है, जो प्लाज्मा में एंटीबॉडी-उत्पादक कोशिकाओं के घातक गुणन द्वारा विशेषता है।
ये प्लाज्मा कोशिकाएं एंटीबॉडी और उनके टुकड़े पैदा करती हैं। घातक प्लाज्मा कोशिकाएं हमेशा एक सामान्य अग्रदूत कोशिका से आती हैं और इसलिए आनुवंशिक रूप से समान होती हैं। वे केवल मोनोक्लोनल एंटीबॉडी का उत्पादन करते हैं। इस बीमारी का कुप्रभाव एक प्रारंभिक अवस्था के अनुरूप हो सकता है, लेकिन यह एक अत्यधिक घातक अवस्था तक भी पहुँच सकता है, जो बिना उपचार के जल्दी घातक हो जाता है। रोग के लक्षण कोशिकाओं के घातक विकास या एंटीबॉडी और एंटीबॉडी टुकड़े से उत्पन्न होते हैं। सबसे आम लक्षणों में हड्डी में दर्द, हड्डी का विघटन और सहज भंग शामिल हैं।
रक्त में कैल्शियम का स्तर अक्सर बढ़ जाता है। इसके अलावा, असामान्य एंटीबॉडी अक्सर ऊतक में जमा होते हैं और अंगों में कार्यात्मक विकार पैदा करते हैं, जिससे गुर्दे की विफलता या बिगड़ा हुआ रक्त प्रवाह जैसे लक्षण हो सकते हैं। Waldström की बीमारी भी एक घातक ट्यूमर की बीमारी है। अधिक सटीक रूप से, यह एक घातक लिम्फोमा रोग है, जिसे धीरे-धीरे आगे बढ़ने और लगभग स्पर्शोन्मुख बी-सेल गैर-हॉजकिन लिंफोमा में गिना जाता है। ज्यादातर मामलों में, घातक लिम्फोमा कोशिकाओं की गतिविधि के कारण मोनोक्लोनल आईजीएम का असामान्य उत्पादन रोग में पता लगाया जा सकता है।
Waldenström की बीमारी इसके गुणों में कई मायलोमा के समान है, लेकिन आमतौर पर एक अधिक अनुकूल पाठ्यक्रम दिखाती है। Waldenström की बीमारी वाले अधिकांश रोगियों का निदान किए जाने के समय तक काफी हद तक स्पर्शोन्मुख है। अन्य रोगियों में लक्षण जल्दी दिखाई देते हैं, जैसे गैर-विशिष्ट थकान या परिधीय न्यूरोपैथिस, जो माइलिन शीथ के भीतर मोनोक्लोनल आईजीएम के जमाव के कारण होता है। यहां तक कि छोटी मात्रा में आईजीएम भी बहुपद को ट्रिगर कर सकता है। उच्च स्तर पर भी अन्य रोगियों में कोई बहुपद नहीं होता है। इसके अलावा, गैर-विशिष्ट लक्षण जैसे कि बुखार, अवांछित वजन घटाने या रात को पसीना हो सकता है। अस्थि दर्द भी विशेषता है।
आईजीएम के अतिउत्पादन के कारण, रक्त हाइपोविस्कस हो जाता है, जिससे कि वर्णित लक्षण हाइपेरविओसिटी सिंड्रोम के साथ जुड़े हो सकते हैं। ज्यादातर मामलों में, रक्तस्राव की यह प्रवृत्ति अक्सर नाक के छिद्रों, सिरदर्द, सामान्य अस्वस्थता या धुंधली दृष्टि और ध्वनिक शिकायतों में प्रकट होती है। इस प्रकार के घातक रोगों का पता लगाने के लिए, इम्युनोएलेक्ट्रोफेरेसिस लंबे समय तक एक मानक निदान प्रक्रिया बन गई है।